细胞迁移实验权威发布_transwell实验和划痕实验(2024年12月精准访谈)
迈德康纳:全能科研外包! 迈德康纳生物科技有限公司是一家在生物技术服务领域有着十几年丰富经验的专业团队,在北京和无锡分别建立了实验中心。公司目前拥有SPF动物实验基地300平方米,基础检测实验中心800平方米,能够满足从细胞到动物的整体服务需求。 젧𛆨实验外包:培养、干预、样本制备、指标检测等单项和整体服务 觉饮验外包:饲养、造模、干预、取材、指标检测等单项和整体服务 课题整包:细胞+动物的综合服务 大综合:方案+实验+数据整理分析+成果指导的全方位服务 迈德康纳秉承人才至上的原则,现有员工中博士占比6%,硕士以上学位工作人员占比超过35%。公司已建立了全面的细胞生物学、蛋白鉴定及分析、病理组化、表观遗传学、动物造模等多个实验平台服务。可为临床医生的科研规划、科研产出、方案设计与评估、基础实验检测提供有力的协助。 젧𛆨实验:包括常规染色HE/特殊染色、细胞凋亡/细胞焦亡/细胞周期、免疫组化:组织芯片/免疫荧光、细胞迁移/细胞侵袭/细胞衰老等。 觉饮验:包括动物饲养环境、大小鼠SPF饲养环境、WB检测/qpcr等。表观遗传:CHIP/DNA/RNA,裸鼠成瘤/手术操作类/药物诱导类等。 迈德康纳动物实验中心提供专业的动物实验服务,包括专人负责日常观察管理、饲料/垫料更换、笼具更换、体征记录等。专业技术人员负责体重称量、灌胃、注射等其他方式给药,以及采血、取样等操作。所有负责人员均具备动物上岗证。 实验动物使用许可证:单位名称为北京迈德康纳生物技术有限公司,法定代表人为刘金武。设施地址位于北京市丰台区南苑路112号6号库,适用范围包括屏障环境的大鼠、小鼠、地鼠,以及普通环境的兔、豚鼠。有效期限为2023年11月7日至2028年11月7日。 堥作单位:包括首都医科大学、北京大学、中国医学科学院、中国中医科学院、复旦大学、上海交通大学、军医大学、南开大学等知名院校,以及北京301医院、304医院、陆军总医院等知名医院。 责任与保证:尊重客观事实,专业分析,不造假,规范每一步实验流程,提供客观真实的专业分析人员与数据分析软件,对数据结果进行分析和统计。严格取材,过硬技术,实验前的样本处理与确认,严格的温度控制与销售工程师上门取样。
细胞迁移实验:10个关键步骤详解 细胞迁移实验是研究细胞行为的重要手段,但实验过程中需要注意许多细节。以下是进行细胞迁移实验时需要关注的10个关键步骤: ꠧ𛆨处理 在开始实验前,需要处理细胞,包括培养、传代和酶消化等。重要的是要确保每次处理的时间和方法一致,以保证实验结果的可靠性。 ⠧𛆨计数 精确计算每个实验组的细胞数是实验的关键。可以通过显微镜观察或使用细胞计数仪来完成。正确的细胞计数有助于实验设计和数据分析。 实验条件 细胞迁移实验需要在特定的温度、湿度和氧气含量下进行,以模拟体内环境。此外,添加的培养基和补充物(如生长因子)也应根据实验需要进行调整。 数据分析 实验后,需要对数据进行准确的分析和统计。这包括比较不同实验组之间的差异,确定每个实验组所含细胞数的平均值和标准差等指标。在数据分析中,应注意检查和排除实验过程中可能出现的误差或偏差。 🠧𛆨适应性 细胞的适应性是实验中需要特别注意的一个方面。在实验前,应将细胞暴露于与实验条件相似的环境中,以使其能够适应新的生长条件。此外,在实验过程中,还应对细胞进行必要的养护和处理,如更换培养基、消毒实验器具等。 ️ 技术操作 细胞迁移实验需要进行多种技术操作,如细胞划痕、Transwell小室、Boyden试验板上下室的分离等。这些技术操作需要仔细掌握,并严格按照实验方法和步骤进行,以保证实验结果的准确性和可重复性。 防止污染 由于细胞容易受到环境中的微生物污染,因此在进行细胞迁移实验时,应严格执行无菌操作规范,使用经过消毒的实验器具和培养基,并定期检查细胞是否存在菌落或其他污染问题。 控制实验变量 在进行细胞迁移实验时,应对实验变量进行充分控制,以减少不必要的误差和干扰。例如,可以控制细胞种类、细胞密度、实验时间、培养基成分等因素,以保证实验结果的准确性。 质量控制 实验中需要进行质量控制,以确保实验结果的准确性和可重复性。这包括对细胞的纯度、活力、稳定性等方面进行检测,并通过细胞培养、传代等操作来保证细胞的稳定性和一致性。 ⚖️ 试验板设计 选择合适的试验板对于实验结果的准确性和可重复性至关重要。通常情况下,会采用Transwell(上下室式小孔培养皿)或Boyden(下室式多孔滤器)等不同类型的试验板,其特点和使用方式也各不相同。
动物实验中心,揭秘动物实验! 欢迎来到北京动物实验中心,这里是探索动物实验的奇妙世界! 动物造模服务 🯸 我们提供各种动物手术模型,包括大小动物模型,以及药物诱导模型。我们进行的行为学检测、影像检测、生化生理指标检测等,确保模型的准确性。 细胞实验 슧𛆨培养、细胞爬片、细胞转染、流式细胞术、慢病毒包装、细胞划痕实验、细胞迁移、细胞侵袭、稳定株筛选、原代细胞分离等,我们都有专业的服务。 病例学检测 从硬组织切片到免疫组化,我们提供全面的病例学检测服务。包括不脱钙切片、脱钙、软化、包埋、切片、染色、特殊染色、免疫荧光、病理图像采集等。 分子生物学检测 슨祅定量PCR、miRNA检测、DNA定量、甲基化测序、质粒提取、质粒构建、菌种鉴定、彗星实验、引物合成等,我们提供专业的分子生物学检测服务。 蛋白相关检测 estern Blot、蛋白质纯化、蛋白质双向电泳、单克隆抗体制备、原核表达、免疫沉淀、免疫共沉淀、SILAC标记定量蛋白质组学等,我们都有专业的检测方法。 快速检测服务 ⚡ ELISA检测、生化检测、血细胞分析、组织样本匀浆、肝功能肾功能、心肌酶谱、血常规、血脂、血糖、凝血因子、尿常规等,我们提供快速的检测服务。 组学服务 基因组学、转录组学、单细胞测序、蛋白质组学、代谢组学、10X Genomics等,我们提供全面的组学服务。 欢迎各位老师前来参观,探索更多动物实验的奥秘!
细胞划痕实验:从零开始到数据分析 细胞划痕实验(Scratch assay or wound-healing assay)是一种常用的细胞生物学实验方法,用于评估细胞的迁移能力。实验的基本原理是:先让细胞在单层上生长,直到它们紧密相连,没有空隙;然后刮去一些细胞,形成“伤痕”,如果细胞能够迅速填补这些空隙,说明它们有迁移能力。 实验步骤: 划线 在六孔板的底面上,用马克笔沿着直尺画三条横线作为标记线。 种板 𑊠 根据实验分组,将细胞种在孔板上,细胞密度大约为5x105个/孔,并确保细胞铺得均匀。 划痕 ✂️ 等细胞长满后,用直尺比着,用200ul的枪头垂直于孔板和标记线划两条垂线,使划痕与标记线相交,形成若干交叉点,这些点将作为固定的检测点。 清洗 弃去旧的培养基,用PBS轻轻润洗两到三次,直到划下来的细胞冲洗干净。 加液 犠 根据实验分组,分别加入加药培养基或无血清培养基。 拍照观察 𘊠 完成划痕、清洗和加液后,用显微镜拍不同倍数的照片,作为0h对照。然后将细胞放入37℃,5%CO2的培养箱中培养。在所需时间点取出细胞,于显微镜下观察同一位置的划痕宽度并拍照。 数据分析 一种是统计细胞迁移的距离,另一种是统计划痕面积。都可以用ImageJ软件来进行分析。 通过这些步骤,你可以评估细胞的迁移能力,进一步了解细胞的行为和特性。
如何做出准确可靠的细胞划痕实验结果(一) 细胞划痕实验(Cell scratch assay)是一种实验室技术,通过在细胞单层上划痕,并用延时显微镜定期捕获图像,来研究细胞的迁移运动、修复能力和细胞间相互作用。要做出准确可靠的结果,需要注意以下几点: 细胞选取 슠 通常选择永生化的细胞系和原代细胞进行实验,如角质形成细胞和成纤维细胞。避免使用生长特别缓慢、贴壁不牢固或堆积生长的细胞。 细胞状态 𑊠 在进行细胞划痕实验前,确保细胞处于适当状态。例如,在进行细胞迁移实验时,需要将细胞培养至密集和平稳的单层,以使划痕后的细胞迁移更为明显。在进行细胞增殖实验时,选择具有相似生长率的细胞,以排除生长速度差异的影响。 细胞培养密度 划痕实验通常涉及多种细胞的结合,但每种细胞的生长速度不同。因此,需要根据细胞的生长特性调整培养密度。密度过低可能影响细胞迁移和增殖,而密度过高则可能导致细胞相互作用和干扰。 细胞基质 ️ 细胞基质是培养细胞所在的支架或基底物,对细胞划痕实验有影响。不同种类和性质的基质可能会对细胞迁移和增殖产生不同程度的影响。因此,需要选择合适的基质,并进行优化和调整。 细胞培养方式 细胞培养方式应改为无血清或低血清的培养基。细胞划痕实验旨在研究细胞迁移,而非细胞增殖,因此需要将细胞增殖的影响降到最低。若细胞在无血清培养后大面积漂浮,可适量加入血清,但浓度不能高于2%。 培养环境 实验应在37℃、5%二氧化碳的培养箱中进行。选取合适的时间点取样拍照,通常按0h、10h、12h、15h等时间点取样拍照(具体时间依实验需要而定)。 实验温度和湿度 在进行细胞划痕实验时,需要保持合适的实验温度和湿度,以确保细胞生长环境的稳定和可靠。通常情况下,温度应保持在37℃左右,湿度应保持在50%-70%之间。 通过以上几点,可以做出准确可靠的细胞划痕实验结果。希望这些建议对你有所帮助!
细胞划痕实验:新手也能轻松上手! 细胞的迁移,听起来是不是很酷?其实,这不仅仅是机体细胞正常功能的一部分,还涉及到我们身体的免疫反应、伤口愈合,甚至是癌症的转移。科学家们一直在研究细胞迁移,希望能找到阻止癌症转移的新方法。今天,我们就来聊聊细胞划痕实验,这可是研究细胞迁移的经典方法哦! 什么是细胞划痕实验? 细胞划痕实验是一种简单又廉价的体外试验方法,用来检测细胞的迁移能力。基本原理是这样的:当细胞长到融合成单层时,你在单层上划一个空白区域,这个区域叫做“划痕”。然后,划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域,使划痕愈合。在这个过程中,我们可以观察到细胞的迁移情况。 实验步骤来啦! 准备6孔板:先用marker笔在6孔板的背后划横线,每隔0.5~1cm一道,确保每孔至少穿过5条线。 铺板:取对数生长期的细胞,用胰蛋白酶消化成单细胞悬液,接种到6孔培养板中。每孔接种6㗱05个细胞,确保第二天细胞能长满。 培养细胞:将培养板放入37℃、5% CO2的培养箱中培养24小时。 划痕:第二天,用*头比着直尺划痕,尽量垂直于背后的横线。注意*头要垂直,不能倾斜哦! 清洗:用PBS洗细胞3次,去除划下的细胞,然后加入无血清培养基。 拍照:在4倍镜下拍照,确保划痕居中且垂直,背景一致。可以按0、6、12、24小时等时间点取样拍照。 小贴士:选择合适的细胞很重要! 选择生长速度适中的细胞,太慢或太快都不行。 选择贴壁牢固的细胞,太松散的会影响实验结果。 避免选择堆积生长或长不满的细胞。 常见问题及解决方案 细胞没长满或长得太满:铺板时的数量要根据细胞的形态、增殖速度和大小来调节。细胞小或增殖慢就多铺点,反之则少铺点。 细胞密度不均匀:铺板时需要边铺边晃动管子,保证细胞在悬液中均匀分布。 拍照小技巧 拍照时一定要保证划痕居中且垂直,背景一致。可以选择不同的时间点拍照,比如0、6、12、24小时等,具体时间点可以根据实验需要来定。 结语 细胞划痕实验虽然简单,但却是研究细胞迁移的重要方法。通过这个实验,我们可以更好地理解细胞的迁移机制,为医学研究提供更多可能。希望这篇文章能帮到你,让你在实验中少走弯路!ꀀ
细胞划痕实验全攻略,小白也能轻松上手! 今天给大家分享一个超实用的实验技巧——细胞划痕实验。这个实验不仅操作简单,而且能很好地反映细胞的迁移能力。下面就让我来详细讲解一下吧! 实验原理 슊首先,我们需要在培养皿或培养板上培养细胞。等到细胞长到融合成单层状态时,用枪头或者硬物在单层细胞上画一条线。这样,这条线上的细胞就会被机械力去除掉,形成一个空白区域,我们称之为“划痕”。然后,继续培养细胞,观察这些细胞如何向无细胞的划痕区域迁移。通过这个现象,我们可以判断细胞的迁移能力。 操作步骤 ꊥ备细胞:将细胞培养到融合成单层的状态。 划痕制作:用枪头或硬物在单层细胞上画一条线。 继续培养:将培养皿或培养板放回培养箱,继续培养细胞。 观察结果:定时观察细胞向划痕区域迁移的情况。 实验结果 通过观察细胞的迁移情况,我们可以得出细胞的迁移能力。迁移得越快,说明细胞的迁移能力越强;反之,迁移得慢或者根本不迁移,说明细胞的迁移能力较弱。这个实验结果对于研究细胞的生物学行为非常有帮助。 小贴士 እꌨ🇧苤𘭨恤🝦无菌操作,避免污染。 划痕的深度和宽度要一致,这样才能更好地比较不同细胞之间的迁移能力。 实验结束后要及时处理废弃物,保持实验室的整洁。 结语 通过这个简单的实验,我们不仅能了解细胞的迁移能力,还能为后续的实验打下基础。希望这篇攻略能帮到你们,让你们在实验中事半功倍!如果有任何问题,欢迎随时交流哦!
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5-Fu实验:测细胞迁移 实验步骤: 配制5-氟尿嘧啶溶液 首先,精密称取10mg的5-氟尿嘧啶,用灭菌蒸馏水溶解,然后定容至100ml的容量瓶中。接着,精密移取1ml溶液,稀释至100ml,得到1ug/ml的5-氟尿嘧啶溶液。 制备单层细胞 将细胞密度为5~10㗱05个/mL的Hep G2细胞铺于24孔板(每孔500 ),加入含10%胎牛血清的RMPI.1640培养液,培养16~24小时,使其形成单层细胞。 划痕处理 以五氟尿嘧啶(5-Fu)为例,首先配制1 /的母液。取45 该母液用PBS稀释至1.1 mL,得到浓度为40 /ML的5-Fu溶液。 用10 移液枪枪头(或无菌牙签)在单层细胞上划出“一”字划痕,用PBS清洗3次。然后加入上述配好的5-Fu溶液,平行两个样本,孵育24小时后换成含10%胎牛血清的RMPI.1640培养液,再孵育24小时。 观察并拍照 吸去培养液,用PBS清洗3次后,在倒置荧光显微镜下观察并拍照。 젩过这个实验,你可以观察抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶对细胞迁移的影响,了解药物对细胞生长的抑制作用。
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