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细胞松弛素前沿信息_细胞松弛素b(2024年11月实时热点)

内容来源：批发价SEO所属栏目：教程更新日期：2024-11-28

细胞松弛素

铀矿尘对支气管上皮细胞遗传毒性及茶多酚有着怎样的防护作用？ ? 前言 ? 流行病学调查显示：接触铀矿尘职业人群主要见于铀矿的开采、选矿、精铀提取等有关核燃料的生产过程。铀矿尘是铀矿勘探和开采的主要职业性有害因素，铀矿尘的组成除了非放射性的二氧化硅粉尘外，还包括放射性粉尘和凝聚核。 ? 铀矿粉尘可通过呼吸道进入人体后形成内辐射，引发损伤。通过对铀作业人员的健康随访研究表明，长期接触铀矿尘与矽肺、肺癌等多种疾病的发生率增高有关。 ? 细胞分组及其染毒 ? 人支气管上皮细胞（BEAS-2B），购自美国ATCC（American Type Culture Collection）。铀矿尘（南华大学核工业铀矿溶浸采矿重点实验室，铀的含量为 4.52‰）用玛瑙研钵研磨后，经 500 目筛过筛，高温高压消毒后用无血清培养液（LHC-8）配成 5 mg/mL 混悬液。 ? 将指数生长期细胞分为空白对照组、铀矿尘染毒组和茶多酚保护组。铀矿尘染毒组按铀矿尘终浓度 1.0、1.5、2.0 mg/mL 加入细胞中；茶多酚保护组在铀矿尘染毒前 2 h 加入终浓度为 250 mg/L 的茶多酚。 ? 中性单细胞凝胶电泳实验 ? 实验分组与染毒同上，染毒24 h 后，收集细胞制成悬液；取 100  1%正常熔点琼脂糖滴至磨砂玻片上，4℃冷却 10 min；取 10  5㗱05 /mL 细胞悬液与 60  低熔点的琼脂糖混匀滴在第一层琼脂糖上，4℃冷却 10 min；在第二层上再滴上 60  低熔点的琼脂糖，放于 4℃冷却 10 min；将玻片放入 4℃细胞裂解液中裂解 2 h；用 0.5% TBE（pH8.2－ 8.5）漂洗 3 次，每次 1 h。 ? 玻片置于中性缓冲液中， 4℃电泳 30 min（25 V，5 mA）； PI 染色 15 min， OLYMPUS 荧光显微镜绿色激发光下观察并拍照；用 CASP. EXE 软件分析彗星细胞，分析尾长、尾部 DNA 百分含量、尾距。每组分析200 个细胞，重复4 次。 ? HPRT 基因突变检测 ? 细胞分组及染毒同上，铀矿尘染毒 24 h 后，用预温的 D-Hanks液洗涤 3 次，立即换新鲜的培养液继续培养。上述染毒后的细胞培养至第 5 代时，每组细胞分为两组，一组加入含终浓度为 0.1 mmol/L 6-巯基鸟嘌呤（6-TG，Sigma）的 LHC-8 培养液，37℃培养 30 h。 ? 同时向两组加入 6 /mL 的细胞松弛素 B（Cytochalasin B，Calbiochem），继续培养 42 h；胰蛋白酶消化，制备细胞悬液，甲醇/冰醋酸（3∶1）；细胞悬液滴片，Giemsa 染色，干燥后，在光镜下计数5000个细胞，记录在同一胞浆内具有完整核膜的双核或多核细胞（包括相压、相切和分离的双核或多核细胞数）。 ? 含有 6-TG 培养细胞中的 1000 个细胞中双核或多核细胞数除以不含 6-TG 培养的 1 000 个细胞中双核或多核细胞数，所得结果为 HPRT 基因位点突变频率（‰），每组重复4次。 ? 铀矿尘诱发BEAS-2B细胞DNA损伤及茶多酚的抑制作用 ? 经不同剂量的铀矿尘染毒的BEAS-2B细胞彗星测定可以看出，各铀矿尘组拖尾细胞数量、尾部 DNA 百分比、尾长、尾距都较对照组明显增加，并随着铀矿尘浓度的增高，这些指标不断增高，表明铀矿尘可造成细胞的 DNA 损伤。而茶多酚对各剂量铀矿尘诱发的 BEAS-2B 细胞 DNA 损伤都有明显抑制作用（p<0.05）。 ? 随着铀矿尘剂量浓度的增高，BEAS-2B 细胞中的微核细胞、多核细胞增多，表明铀矿尘对细胞染色质损伤加重，茶多酚对铀矿尘所诱发的微核及多核细胞增多有较好的抑制作用。 ? 结论 ? 铀矿尘通过呼吸道进入人体，它对人体造成的危害主要是由于粉尘在肺泡、支气管等表面的沉积以及所含放射性物质的辐射所引起。 ? 放射性粉尘长时间滞留于肺气管、支气管和淋巴结内，可构成潜在的内照射危害。在对湖南某铀矿矿工 655 例死亡原因的调查中，肺癌的标化死亡比为 2.29，且死亡数大于矽肺死亡例数。 ? 铀矿尘中 €射线具有直接损伤 DNA 的能力，也可通过产生包括活性氧（ROS）在内的多种自由基的间接作用造成 DNA 氧化损伤。

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